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    今日解答:關(guān)于抗體純化的方法!

    發(fā)布時(shí)間: 2020-02-21  點(diǎn)擊次數(shù): 1887次

    我公司具有yi流的抗體技能效力團(tuán)隊(duì),可為客戶供給多種抗體純化效力,如硫酸銨純化、Protein A/G純化、抗原親和純化等,協(xié)助客戶處理各種抗體純化問(wèn)題。今天我們就來(lái)看看那些關(guān)于抗體純化的方法吧!

    1.抗體純化的辦法包括DEAE離子交換色譜法、硫酸銨沉淀法及其他辦法,其間蛋白G或蛋白A親和柱法純化較為簡(jiǎn)單、高效,抗原親和柱法純化則能獲得針對(duì)抗原的特異性抗體。

    2.制備高特異性、高效價(jià)的抗體是實(shí)驗(yàn)免疫學(xué)技能的根底,抗體質(zhì)量的凹凸將直接影響實(shí)驗(yàn)的勝敗。多克隆血清中含有凌亂多樣的抗體,它不只含有針對(duì)免疫原發(fā)生的抗體,還有血清的全部抗體,此外還含有許多自身的血清蛋白。為了獲得成分相對(duì)單一的抗體或?qū)⒖贵w用于特定的用處,就需要對(duì)抗體進(jìn)行純化處理。

    3.純化抗體的用處之一是下降非特異性本底,能去除引起實(shí)驗(yàn)差錯(cuò)的污染蛋白,且能精確控制實(shí)驗(yàn)中發(fā)生陽(yáng)性信號(hào)的抗體量, 因而純化抗體可以作為全部免疫化學(xué)實(shí)驗(yàn)中下降本底的根本手法。別的,運(yùn)用純化抗體還能進(jìn)行抗體符號(hào)(減少有時(shí)運(yùn)用符號(hào)二抗帶來(lái)的攪擾),或用于制備免疫親和純化柱等。
    注:
    1. 蛋白A或蛋白G是細(xì)菌胞壁蛋白,它們能結(jié)合抗體Fc段,這一結(jié)合十分結(jié)實(shí),但其親和力對(duì)pH的改變活絡(luò),抗體/蛋白A或蛋白G的親和力隨PH值的下降而急劇下降,因而可用于純化不同來(lái)歷的抗體和抗體亞型。
    2. 在抗血清中免疫球蛋白IgG的含量為8-12 mg/ml,只占血清中總蛋白含量的10%左右。蛋白A/G純化抗體的得率大約為5-10 mg總IgG/ml 抗血清。

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