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ELISA試劑盒的技術手段
發(fā)布時間： 2015-12-07 點擊次數(shù)： 1523次現(xiàn)在做方陣，做ELISA試劑盒已是輕車熟路了，以前檢測一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的，現(xiàn)在給我十個八個的從包被到顯色，一個工作日基本搞定?？墒窃谛吕鲜植倏v過程中老是會泛起或大或小的題目，本人在剛開始做ELISA試劑盒時就面對良多災題，固然有師兄師姐鋪路，但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣，好比說花板，假陽性，全顯色，全部顯色，顯色比空缺還低。大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。
小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。還有有的包被原可能不是蛋白，對于生物素和脂類物質或小分子物質我們要事先對其改造再加以包被，ELISA試劑盒親和素生物素:先親和素先包被載體，加入生物素化的DNA，這種包被方法平均、牢固，已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
ELISA試劑盒試驗中，檢驗同一樣本達20次以上時，就會發(fā)現(xiàn)這組數(shù)據(jù)（指測定結果的吸光值）分布在均值兩側，大部分集中在均值附近。如果以測定值為橫坐標，以出現(xiàn)的頻率為縱坐標作圖，就可繪出一個呈鐘形的曲線圖。鐘頂處為均值，其他值以均值為中心對稱分布，這就是正態(tài)分布。
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